如何制备固定化酶?竞争性抑制剂的特征是什么?消除酶抑制的方法。

2019-08-13 08:11
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常规生产固定化酶的方法
(1)吸附法是通过物理吸附将酶固定在载体如纤维素和琼脂糖,载体如多孔玻璃和离子交换树脂上的方法。
显着的特点是:简单的工艺和温和的条件涉及有机和无机聚合物材料,吸附过程可以同时实现净化和固定,酶可以在灭活后重新激活和车辆也可以再生。
然而,载体需要具有大的比表面积和生活表面1。
(2)嵌入方法嵌入固定化方法是将酶固定在高分子材料的晶格结构,微胶囊的结构等上的方法,基质可以渗透到晶格或微胶囊中与酶接触。。
该方法相对简单,酶分子仅被嵌入并且生物活性被破坏,但该方法不适用于大分子底物。
(1)网状种类称为网状包含法,将酶包裹在细网状中,形成固定化形式的固定化酶。
也称为凝胶镶嵌。
(2)微胶囊的类型将酶包埋在高分子量聚合物的颗粒中以制备固定化酶。
因为形成的酶珠直径通常为几微米至几百微米,所以它们也称为微囊化方法。
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3)通过离子键合在不溶性固相载体上将酶固定在不溶性固相载体表面上的方法称为离子键合方法。
其中形成共价键的化学形成的固定方法称为共价键合。
共价方法具有很强的亲合力,酶在使用中不易分离,稳定性好。
该方法的缺点是载体的活化或固定是复杂的,并且由于反应条件相对较强,因此通常需要严格控制条件以更积极地获得固定化酶。有。
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四交联方法包括用多功能试剂交联酶蛋白,使酶蛋白和多功能试剂之间形成共价键,否则三元交联网络结构得到了。除交联外,还存在一些分子内交联。
用多功能试剂制备固定化酶的方法可分类如下。(2)吸附在载体表面后,交联。(3)使多官能试剂与载体反应,得到功能性载体,并使酶重新连接。
有许多类型的交联剂,最常用的戊二醛,和其它异氰酸酯衍生物,双偶氮二苯基苯胺,N,N-乙烯马来酰亚胺等。
交联方法的优点是酶和载体紧密结合,稳定性高,缺点是某些方法难以固定,当酶经化学修饰时无活性。要成为===竞争性抑制剂和抑制性酶底物通常具有结构相似性,并与底物竞争酶分子中可逆地抑制酶活性的结合位点。
与酶的活性中心结合。
与酶结合是可逆的。
===增加底物浓度可能会降低竞争性抑制剂的作用。


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